Niveles de mercurio en cabello de individuos expuestos ocupacionalmente en el área odontológica (página 2)

MATERIALES Y MÉTODOS

Equipos

En las determinaciones analíticas del Hg se
utilizó un espectrofotómetro de absorción
atómica, marca
Perkin-Elmer, modelo 460, al
cual se le acopló un sistema de
generación de hidruros y mercurio, marca Perkin-Elmer,
modelo MHS-10. Se emplearon las condiciones operacionales e
instrumentales reportadas por Rodríguez1
para la determinación total del Hg en las muestras de
cabello utilizando la espectrometría de absorción
atómica con vapor frío (CVAAS). La
mineralización de las muestras se realizó a
través del uso de un horno microondas,
marca CEM, modelo MDS-81D, y de reactores de digestión
marca PAR, modelo 4782. Los volúmenes se midieron con
micropipetas marca Gilson, empleando puntillas de polipropileno
grado premium. Se utilizó una balanza analítica
marca Denver, modelo AA-200DS, con una sensibilidad de
± 0,01 mg, para
determinar la masa de las diferentes porciones de prueba
(muestras de cabello).

Reactivos

Todos los reactivos empleados fueron de grado
analítico o certificado. La solución de borohidruro
de sodio, marca Merck, se preparó al 3% en
hidróxido de sodio (Merck) al 1%. Las soluciones de
ácido nítrico (Merck) se prepararon al 1,5%. Para
aforar las muestras mineralizadas se utilizó una mezcla de
ácidos
nítrico/perclórico
(HNO3/HClO4) 1,0 M, preparada a partir de
los ácidos concentrados (ambos Merck). La solución
concentrada de Hg (ca. 100 mg/L) se obtuvo a partir del
óxido de Hg (II) (Merck). Los patrones acuosos de la curva
de calibración (e.g., 10, 20 y 50 ng de Hg) se prepararon
a partir de una solución de 1,00 mg Hg/L. Todas las
soluciones se prepararon con agua
bidestilada y desionizada grado I ASTM (del inglés:
"American Society for Testing and Materials"), con una
conductividad eléctrica > 16,6 MW cm2 a 25ºC
1

Población bajo estudio

Las muestras de cabello se tomaron de 30 individuos del
sexo femenino
con edades comprendidas en un intervalo de 17 a 65 años,
con una mediana de 35. Los 15 individuos expuestos
profesionalmente al mercurio en el área
odontológica (e.g., odontólogos y asistentes
dentales) constituyeron el grupo expuesto
y los 15 restantes, no expuestos a ninguna fuente conocida de
mercurio, formaron el grupo control. Los
individuos expuestos de este estudio tenían 5 o más
años de ejercicio profesional y manipulaban la amalgama
por lo menos 1 vez por semana. Ambos grupos fueron
residentes de la ciudad de Maracaibo, Venezuela, o
de poblados circunvecinos a esta ciudad con una antigüedad
no menor de un año y no presentaron tratamientos
estéticos en el cabello. Todos los individuos manifestaron
su autorización por escrito para realizar las evaluaciones
contempladas en esta investigación, así como
también respondieron a una encuesta que
se utilizó como instrumento para recaudar información referente a los datos personales,
ocupación, número de amalgamas presentes en la
cavidad bucal, alimentación,
hábitos, etc..

Recolección y procesamiento de las muestras de
cabello

Se cortaron con una tijera aproximadamente 2 cm de
cabello distal de la región occipital a cada individuo de
ambos grupos. Los especímenes de cabello se recolectaron
en bolsas de plástico
con cierre hermético, previamente rotuladas, y luego se
almacenaron a 4°
C. Cada porción de prueba de la muestra de
cabello se remojó aproximadamente por 5 minutos en 5 mL de
acetona; posteriormente, se escurrió en la campana de
extracción y se repitió el proceso un par
de veces, por 1 minuto cada vez. Luego, se secó el cabello
por evaporación de la acetona. Previo al análisis espectrométrico, cada
muestra de cabello se sometió al proceso de
mineralización previamente reportado por Rodríguez
1 con la finalidad de obtener el Hg en su
máximo estado de
oxidación: requerimiento químico indispensable para
la determinación analítica del mismo.

Procedimientos

Las determinaciones analíticas de mercurio se
realizaron utilizando la CVAAS. La cuantificación del Hg
en las muestras de cabello humano, previamente mineralizado, se
realizó por curvas de calibración elaboradas con
patrones acuosos en ácido nítrico 1,5%. La
ecuación de la curva de trabajo fue:
Ap = 0,010 c (coeficiente de correlación, r = 0,9998);
donde (Ap) es la absorbancia en altura de pico y (c) la cantidad
de Hg en ng. Cada muestra se mineralizó por triplicado y
cada porción de prueba a su vez se analizó por
triplicado, obteniéndose la media, la desviación
estándar y la desviación estándar
relativa.

Se evaluaron los parámetros de mérito
analítico del método
para validar la metodología empleada1 y
obtener una herramienta confiable de análisis, debido a la
importancia clínica de las determinaciones mercuriales. En
tal sentido, la exactitud del método
espectrométrico empleado para la determinación del
analito se verificó determinando Hg por CVAAS en un
material certificado (e.g., atún), observándose
adecuada similitud entre el valor
experimental (ca. 1,47 ± 0,01 m g Hg/g) y el valor certificado (ca.
1,45 ±
0,10 m g
Hg/g), con un error relativo del 1,4% y una exactitud porcentual
del 101,4%, lo cual evidenció una adecuada exactitud por
estar incluido este valor porcentual dentro del intervalo
teórico aceptable del 95 al 105%. La precisión
encontrada (ca. <
3,5%, expresada como desviación estándar
relativa) fue adecuada para este tipo de análisis. No hubo
interferencias espectrales y no espectrales. El límite de
detección (3s
) fue 0,30 m
g Hg/g de cabello y la masa característica fue 4,4
ng de Hg. En consecuencia, el método analítico
utilizado en este estudio para la determinación de Hg en
cabello humano mineralizado por CVAAS fue exacto, preciso y libre
de interferencias. Por lo tanto, una vez optimizado el
método se empleó para la subsecuente
determinación del Hg en las muestras
mencionadas.

Análisis estadístico

Los datos fueron registrados en la computadora
y se utilizó el programa
Statistical para el análisis estadístico. Todas las
evaluaciones estadísticas se realizaron empleando los
métodos
convencionales (e.g., prueba t de Student no pareada,
correlación lineal, etc.) y las diferencias se
consideraron significativas a p < 0,05 (ca. límite de confianza
> 95%).

RESULTADOS

λ En este estudio la media aritmιtica de Hg
presente en cabello correspondiente al grupo
expuesto fue de 2,07 ± 2,23 m g Hg/g (ca. intervalo experimental: 0,13 –
7,91 m g Hg/g);
mientras que la media obtenida para el grupo control fue de
2,65 ±
2,06 m g
Hg/g (ca. intervalo experimental: 0,75 – 6,75 m g Hg/g). El estudio de
significancia estadística empleando la prueba t de
Student no pareada, reveló que las concentraciones de Hg
en cabello de ambos grupos fueron estadísticamente
indistinguibles (p > 0,05) (Tabla 1).

Tabla
1.
Niveles de mercurio presentes en las muestras de cabello de
los grupos expuesto (E)
en el área odontológica y control (C) evaluados por
CVAAS.

c
A : media aritmética. DE:
desviación estándar. cG : media
geométrica. Entre paréntesis se indica el intervalo
experimental.

λ No existieron diferencias estadνsticamente
significativas en la concentraciσn de Hg en
cabello de los individuos que presentaron amalgamas en la cavidad
bucal y aquéllos que no las presentaron (p
> 0,05) (Tabla 2 y
3).

Tabla 2.
Relación de las concentraciones de Hg en cabello con el
número total de superficies de amalgama
(NTSA) y el número promedio de superficies de amalgama
(NPSA) por individuo,
presentes en la cavidad bucal.*

*
Datos tomados de la encuesta realizada a los sujetos
participantes de este estudio. Entre paréntesis se indica
el intervalo experimental.

Tabla
3.

Niveles de mercurio en cabello (media
± 1DE, m
g Hg/g) de la población total bajo estudio (n=30)
con y sin restauraciones de amalgamas.a

a Datos tomados de la encuesta
realizada a los pacientes participantes de este
estudio.

* No hay diferencias
estadísticamente significativas (p > 0,05) al aplicar la prueba t
de Student no pareada. Entre paréntesis se indica el
intervalo experimental.

λ El grupo profesional (expuestos) que
colocσ mαs de 25 amalgamas por semana no
presentó diferencias significativas con respecto a aquel
que colocó menos de 25 amalgamas por semana (p
> 0,05) (Tabla
4).

Tabla 4.
Niveles de mercurio en cabello presente en los individuos
expuestos asociados
al número de amalgamas manipuladas por
semana.a

a Datos tomados de la encuesta
realizada a los pacientes participantes de este
estudio.

* No hay diferencias
estadísticamente significativas (p > 0,05) al aplicar la prueba t
de Student no pareada. Entre paréntesis se indica el
intervalo experimental.

λ Al aplicar el test
estadνstico (e.g., prueba t de Student no pareada) para
relacionar el nivel de Hg entre los individuos con y sin
hαbitos como: fumar, apretar los dientes en la
noche, morder objetos, masticar chicle y masticar hielo, se
encontró que no existieron diferencias
estadísticamente significativas entre los dos grupos
considerados para cada variable (p > 0,05) (Tablas 5).

Tabla 5.
Niveles de mercurio en cabello de la población total bajo
estudio de la ciudad de Maracaibo
y zonas circunvecinas asociados a hábitos
personales.a

a Datos tomados de la encuesta
realizada a los individuos participantes de éste estudio.
b Concentración de Hg ± DE en
m g/g.
* No hay diferencias
estadísticamente significativas (p > 0,05) al aplicar la prueba t
de Student no pareada. Entre paréntesis se indica el
intervalo experimental.

DISCUSIÓN

En este estudio se observó que los niveles de
mercurio en cabello de los individuos expuestos son iguales a los
niveles de mercurio en cabello de los individuos no expuestos en
el área odontológica. Estos resultados coinciden
con la opinión de un grupo de investigadores de Estocolmo,
Suecia, quienes afirman que la
contaminación ocupacional por Hg en la clínica
dental es actualmente baja, debido al uso de cápsulas
predosificadas y al desarrollo de
adecuadas condiciones de ventilación. 8
Asimismo, Eames & Cols. 13 señalaron
que una clínica dental bien ventilada y con aire
acondicionado central debe proveer un ambiente
seguro, si el
odontólogo y su equipo de trabajo tienen precauciones
razonables en el manejo del mercurio. Al analizar las encuestas
realizadas al personal en
relación al manejo del Hg y al ambiente de trabajo se
observó que todas las clínicas presentaban sistemas de
aire
acondicionado central, razón por la cual posiblemente los
niveles de mercurio en cabello de los individuos expuestos sea
igual a los no expuestos (p > 0,05), a pesar de que las asistentes
dentales no utilizaron tapa boca en un 90% de los casos
estudiados. En la literatura consultada no se
encontró información sobre los valores de
referencia para el mercurio presente en cabello de individuos
expuestos en el área odontológica, tanto a nivel
nacional como internacional. No obstante,
Vasken,16 obtuvo un aumento significativo de la
excreción de Hg en la orina de individuos expuestos en el
área odontológica en relación con el grupo
no expuesto, tras la medicación por vía oral de 300
mg de Dimaval (e.g., 2,3 dimercapto-1-propano sulfonato de
sodio), el cual es un agente quelante o droga empleada
para la remoción corporal del Hg en caso de
intoxicación mercurial.

En relación a la liberación de mercurio a
partir de las restauraciones de amalgama presentes en la
población bajo estudio, no se encontraron diferencias
estadísticamente significativas en la concentración
de mercurio presente en el cabello de los individuos con y sin
restauraciones de amalgamas; sin embargo, estudios previos
dirigidos a la verificación de la liberación de Hg
proveniente de amalgamas presentes en la cavidad bucal han
confirmado la liberación del mismo, principalmente en
forma de vapor de Hg,17,7,18,11 el cual es
fácilmente absorbido por el cuerpo a través de las
vías respiratorias y las vías digestivas al
disolverse en los fluidos de la cavidad bucal; no obstante,
Berglund (1993) observó que la concentración de
mercurio en la orina no se alteraba después de colocar una
obturación con amalgama. En oposición a esto, Chien
& Cols.5 reportaron una pequeña
diferencia entre los niveles de mercurio en orina antes y
después de colocada una restauración de amalgama,
aunque consideraron que el riesgo asociado
al uso de este material es mínimo para la población
en general.

En relación al número de amalgamas
manipuladas por semana, los resultados obtenidos en este estudio
coinciden con los obtenidos por Skare y cols.8
quienes aseveran que no existió una contribución
significativa del mercurio total presente en orina.

Los resultados obtenidos por Skare y
cols.8 revelaron una pequeña influencia
en los niveles de mercurio en orina posterior a la
masticación de chicle, lo que evidencia un mínimo
aporte del metal desde la cavidad bucal, vía
sanguínea, hasta el sistema urinario para su
excreción. Asimismo, este estudio establece que esta
variable ha sido poco utilizada para evaluar la liberación
de Hg a partir de las amalgamas dentales.

CONCLUSIONES

El grupo expuesto de este estudio presentó
niveles de concentración de Hg iguales a los del grupo
control; por lo tanto, el nivel de vapor de Hg absorbido en la
clínica dental no influyó en el nivel de Hg en
cabello del grupo expuesto, debido posiblemente al uso de
sistemas de aire acondicionado y buena ventilación que
presentaron las clínicas dentales.

El cabello resultó una muestra biológica
útil para determinar la contaminación ambiental por Hg en el
área odontológica. Además, fue una muestra
económica en relación a su recolección y
almacenamiento,
no invasiva ni perecedera y no es portadora de enfermedades como otras
muestras biológicas (e.g., sangre, semen,
saliva, heces fecales, orina, etc.).

En este trabajo se demostró que la
población de la ciudad de Maracaibo y las zonas
circunvecinas, presentaron Hg en el cabello y estos niveles
pueden ser empleados como valores
referenciales para la población no expuesta
ocupacionalmente de la región Zuliana.

Los resultados obtenidos en este estudio revelaron que
el manejo y uso apropiado de la amalgama dental no altera el
nivel de mercurio presente en el cabello del personal que labora
en la clínica dental.

AGRADECIMIENTOS

Esta investigación fue parcialmente financiada
por el Consejo de Investigaciones
Científicas y Tecnológicas (CONICIT) y por el
Consejo de Desarrollo Científico y Humanístico de
la Universidad del
Zulia (CONDES-L.U.Z.) a través de la dotación
instrumental previa. Los autores agradecen a
FUNDADESARROLLO-LUZ la
ampliación de la infraestructura física del
L.I.A.-L.U.Z..

Bibliografia Complementaria

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Sorely C. Bello1, Minerva C.
Rodríguez2,Denny R.
Fernández2, Aracelis del C.
Vásquez2, Ana M. Ocando2,
José R. Contreras3 y Víctor A.
Granadillo2*
1 Cátedra de Histología y Embriología General, Facultad de
Odontología.
2 Laboratorio de
Instrumentación Analítica,
Departamento de Química, Facultad Experimental de Ciencias; y
3 Instituto de Investigación, Facultad de
Odontología. Universidad del Zulia. Maracaibo,
Venezuela.
Correspondencia: Profesor M.Sc.
Víctor A. Granadillo
Laboratorio de Instrumentación Analítica (L.I.A.),
Departamento de Química, Módulo 2, Facultad
Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia, Maracaibo
4011.TeleFax: 0261-7598154